Pozdrav svima
1 Nivoi organizacije živih bića
UVODNA VEŽBA : Sistemi organa
UVODNA VEŽBA : Osnovno o ćeliji
VEŽBA: Identifikacija nepoznate prirodne supstance
3 Proteini3.1 Proteini krvi
Krv
Plazma
Proteini plazme: albumin
Uobličeni krvni elementi: eritrociti, leukociti i trombociti
Proteini eritrocita: membranski proteini i hemoglobin
Membranski proteini
Hemoglobin i glikozilovani hemoglobin
VEŽBA: Proteini krvi
Odvajanje plazme i izolovanje eritrocita iz krvi
Hemoliza eritrocita i izolovanje hemoglobina i membrana
SDS elektroforeza proteina plazme i membrana eritrocita
Određivanje albumina iz plazme afinitetnom hromatografijom
Određivanje molekulske mase hemoglobina gel filtracijom
Određivanje hemoglobinske, HbA1 frakcije
3.2 Ponašanje proteina
3.2.1 Konformacioni prelazi (denaturacija) proteina
3.2.2 Protein - ligand interakcije
VEŽBA: Ponašanje proteina
Reverzibilna denaturacija albumina
Odvajanje hema od globina
Interakcije hemoglobina (Hb) sa kiseonikom
Dodatak: Metodologija rada sa proteinima
Opšti principi izolovanja proteina: ekstrakcija i taloženje
Hromatografske metodeGel-filtracija
Jonoizmenjivačka hromatografija
Afinitetna hromatografija
Ispitivanje homogenosti proteina
Gel elektroforeza (PAGE)
SDS gel elektroforeza
Određivanje koncentracije proteina
Biuretska metoda
Lowry-jeva metoda
Bradford-ova metoda (vezivanje boje)
4. Enzimi
4.1 Podsetnik iz kinetike
4.1.1 Brzina hemijske reakcije
4.1.2 Termodinamika i kinetika: teorija prelaznog stanja
Prelazno stanje
Energija aktivacije i konstanta brzine reakcije
Katalizatori ubrzavaju reakciju snižavanjem energije aktivacije
4.2 Glavne karakteristike enzima kao katalizatora
4.2.1 Enzimi koriste energiju vezivanja enzima i supstrata u katalizi
4.2.2 Aktivno mesto enzima komplementarno je tranzitnom stanju supstrata
4.2.3 Specifičnost enzima
4.3 Kinetika enzimskih reakcija
4.3.1 Osnovne jednačine enzimske kinetike
Značenje konstante Km
Karakteristike Michaelis-Mentenove jednačine
Grafičko prikazivanje Michaelis-Menten-ove jednačine
4.3.2 Eksperimentalno određivanje Km i V
4.4 Inhibicija enzima
Kompetitivna inhibicija
Nekompepitivna inhibicija
4.5 Uticaj pH na aktivnost enzima
4.6 Određivanje (aktivnosti) enzima
Početna brzina kao funkcija [E]
Enzimske jedinice i specifična aktivnost enzima-određivanje [E]Određivanje aktivnosti i izolovanje i prečišćavanje enzima
4.7 Sigmoidna kinetika
4. 8 Zadaci i problemi
VEŽBA: Osnovno o kinetici enzima
VEŽBA: Određivanje aktivnosti enzima
Određivanje aktivnosti tripsina
Određivanje aktivnosti katalaze u eritrocitima
Određivanje aktivnosti laktat dehidrogenaze u plazmi/serumu
5. Nukleinske kiseline5.1 Principi izolovanja DNK iz biološkog materijala
5.2 Spektralna karakterizacija DNK
VEŽBA: Izolovanje i karakterisanje DNK
6. Bioenergetika i metabolizam6.1 Podsetnik iz termodinamike
Toplota, rad i energija - prvi princip termodinamike
6.2 Entropija, slobodna energija i ravnoteža
ΔG i konstanta ravnoteže reakcije
ΔG i elektrohemijski potencijal
6.3 Primena koncepta ΔG u metabolizmu
6.3.1 Opšti principi
6.3.2 Endergoni i egzergoni procesi
Kuplovane reakcije. Zajednički intermedijer
Struktura i osobine adenozin trifosfata (ATP)
Drugi, biološki važni derivati fosfata
ATP i biosinteza
Aktivni transport
Egzergoni procesi
Glikoliza
Respiracija
Fotosinteza
ZADACI I PROBLEMIPRILOG: STANDARDNI REDUKCIONI POTENCIJALI,
OKSIDO-REDUKCIONIH REAKCIJA U BIOHEMIJI
VEŽBA: Glikoliza/Fermentacija













